Comamonas testosteroni 5-MGAM-4D来源的腈水合酶基因重组菌对腈类化合物的全细胞催化活性

刘胜先 杜文静 崔宝程 黄姣 郭祎 王黎

刘胜先, 杜文静, 崔宝程, 黄姣, 郭祎, 王黎. Comamonas testosteroni 5-MGAM-4D来源的腈水合酶基因重组菌对腈类化合物的全细胞催化活性[J]. 食品工业科技, 2020, 41(24): 94-99. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2020030127
引用本文: 刘胜先, 杜文静, 崔宝程, 黄姣, 郭祎, 王黎. Comamonas testosteroni 5-MGAM-4D来源的腈水合酶基因重组菌对腈类化合物的全细胞催化活性[J]. 食品工业科技, 2020, 41(24): 94-99. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2020030127
LIU Sheng-xian, DU Wen-jing, CUI Bao-cheng, HUANG Jiao, GUO Yi, WANG Li. Whole-cell Catalytic Activity of Nitrile Hydratase on Nitrile Compounds Derived from Comamonas testosteroni 5-MGAM-4D[J]. Science and Technology of Food Industry, 2020, 41(24): 94-99. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2020030127
Citation: LIU Sheng-xian, DU Wen-jing, CUI Bao-cheng, HUANG Jiao, GUO Yi, WANG Li. Whole-cell Catalytic Activity of Nitrile Hydratase on Nitrile Compounds Derived from Comamonas testosteroni 5-MGAM-4D[J]. Science and Technology of Food Industry, 2020, 41(24): 94-99. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2020030127

Comamonas testosteroni 5-MGAM-4D来源的腈水合酶基因重组菌对腈类化合物的全细胞催化活性

doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2020030127
基金项目: 

辽宁省自然科学基金(20170540184,20180551049)。

详细信息
    作者简介:

    刘胜先(1995-),女,硕士研究生,研究方向:基因工程菌的构建及催化活性研究,E-mail:christal@mail.dlut.edu.cn。

    通讯作者:

    王黎(1985-),女,博士,讲师,研究方向:生物催化及转化,E-mail:wang_li@dlut.edu.cn。

  • 中图分类号: TS201.2

Whole-cell Catalytic Activity of Nitrile Hydratase on Nitrile Compounds Derived from Comamonas testosteroni 5-MGAM-4D

  • 摘要: 目的:通过基因工程方法获得高效表达腈水合酶的基因工程菌CtNHase,探究其对腈类物质的全细胞催化作用,并考察pH、温度对全细胞催化反应的影响。方法:对来源Comamonas testosteroni 5-MGAM-4D的腈水合酶基因进行PCR扩增,以pET-24a为载体,构建基因重组表达质粒后,转化大肠杆菌感受态细胞进行SDS-PAGE蛋白表达验证,并通过色谱检测分析对底物丙烯腈和己二腈的转化情况。结果:在pH=7.4,30 ℃条件下,基因重组菌CtNHase催化活性最高,可通过全细胞催化在5 min内完全转化50 mmol/L己二腈生成己二酰二胺,在5 h内完全转化500 mmol/L丙烯腈生成丙烯酰胺。结论:基因重组菌CtNHase可高效催化丙烯腈和己二腈生成丙烯酰胺和己二酰二胺,具有潜在的工业应用价值。
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  • 收稿日期:  2020-03-12

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